黃曲霉毒suB1（Aflatoxin B1簡(jiǎn)寫為AFB1）是目前已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性zui強(qiáng)的一種。黃曲霉毒suB1對(duì)人和若干動(dòng)物具有強(qiáng)烈的毒性，其毒性作用主要是對(duì)肝臟的損害。國(guó)家質(zhì)檢總局規(guī)定黃曲霉B1是大部分食品的必檢項(xiàng)目之一。本品的檢測(cè)靈敏度為5ng/ml。

【測(cè)定原理】

本品采用高度特異性的抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù)，通過(guò)單克隆抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合AFB1-BSA偶聯(lián)物和樣品中可能含有的AFB1的原理。試劑含有被事先固定于膜上測(cè)試區(qū)（T）的AFB1-BSA偶聯(lián)物和被膠體金標(biāo)記的抗AFB1單克隆抗體。

【樣品制備】

使用儀器：①感量0.1g的天平 ②玻璃器皿：蒸發(fā)皿或燒杯、量筒、滴管、移液管 ③小型粉碎機(jī)、④ 4000rpm離心機(jī)等。

1. 谷物：任取5g以上有代表性樣品并粉碎過(guò)20目篩，準(zhǔn)確稱取2.0g均勻粉碎試樣于配套離心管中，再準(zhǔn)確加入4ml純凈水和4.0ml乙酸乙酯，將瓶塞蓋緊密封，充分振蕩5min，4000rpm離心1min得上清液，將上清液用吸管移出2.0ml到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中，用電吹風(fēng)吹干上清液，再根據(jù)樣品的種類用以下規(guī)定的稀釋液量用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗，*溶解杯底所有的固體，此溶解液為樣品提取液即檢測(cè)液?？紤]不同樣品對(duì)黃曲霉毒suB1的高含量要求，請(qǐng)參考下表進(jìn)行用稀釋液溶解杯底固體：

2. 飼料（以殘留*50ppb計(jì)算）：任取5g以上有代表性樣品并粉碎過(guò)20目篩，準(zhǔn)確稱取2.0g均勻粉碎試樣于配套離心管中，再準(zhǔn)確加入4ml純凈水和4.0ml乙酸乙酯，將瓶塞蓋緊密封，充分振蕩5min，4000rpm離心1min得上清液，將上清液用吸管移出0.5ml到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中，用電吹風(fēng)吹干上清液，再用2ml的稀釋液量用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗，*溶解杯底所有的固體，此溶解液為樣品提取液即檢測(cè)液。如果殘留*是30ppb，則用1.2ml的稀釋液溶解；如果殘留*是40ppb，則用1.6ml的稀釋液溶解。

3. 食用油：稱2.0g油樣于小燒杯中，用8ml正乙烷分次將試樣轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，準(zhǔn)確加入4ml純凈水充分振蕩3min，吸去上層正乙烷層，再加入4ml的乙酸乙酯，將瓶塞蓋緊密封，充分振蕩5min，靜置或3000rpm離心得上清液，將上清液用吸管移出2ml到小玻璃杯中，用電吹風(fēng)吹干，再用稀釋液溶解后為樣品提取液。

4. 醬油、醋、發(fā)酵酒：稱取25.0g樣品于小燒杯中，用5ml蒸餾水將試樣轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，加入20ml三氯甲烷，加塞輕輕振搖3min，靜置分層。放出下層三氯甲烷層，經(jīng)盛有約5g預(yù)先用三氯甲烷濕潤(rùn)的無(wú)水Na2SO4過(guò)濾器于蒸發(fā)皿中，后用少量三氯甲烷洗滌過(guò)濾器，洗液并于蒸發(fā)皿中，用電吹風(fēng)吹干。吹干冷卻后，準(zhǔn)確加入稀釋液，將蒸發(fā)皿中的凝結(jié)物充分溶解。

【操作步驟】

1. 在進(jìn)行檢測(cè)前先完整閱讀使用說(shuō)明書，使用前將試紙卡和待檢樣本溶解恢復(fù)至室溫。

2. 從原包裝袋中取出試紙卡，打開(kāi)后平放在桌面上，請(qǐng)?jiān)?小時(shí)內(nèi)盡快使用。

3. 用吸管吸取待檢樣品溶液，滴加3滴于加樣孔中，加樣后開(kāi)始計(jì)時(shí)。

4. 結(jié)果應(yīng)在5min左右讀取，超過(guò)10min的時(shí)間判讀無(wú)

【結(jié)果判定】

1.陽(yáng)性：位置C顯示出紅色線條，而位置 T不顯色時(shí)為陽(yáng)性。陽(yáng)性結(jié)果表明：AFB1含量超過(guò)樣品允許量。

2.陰性：位置C顯示出紅色線條，位置 T同時(shí)顯示出紅色線條，且T線顏色接近C線或者深于C線時(shí)，判為陰性。陰性結(jié)果表明：AFB1含量低于樣品允許量。

3.無(wú)效：位置C不顯示出紅色線條而位置 T顯示出紅色線條或位置C和位置 T均無(wú)線，該試紙卡視為無(wú)效。建議使用新的試紙卡按本說(shuō)明書要求重新測(cè)試。

【特別說(shuō)明】

1.請(qǐng)按照操作步驟進(jìn)行測(cè)試，操作時(shí)請(qǐng)勿觸摸試紙顯示區(qū)。

2.如購(gòu)買時(shí)發(fā)現(xiàn)過(guò)期，破損，污染，無(wú)效的產(chǎn)品，請(qǐng)到購(gòu)買處進(jìn)行更換。

3.本品應(yīng)保存在干燥陰涼處（4--30℃），有效期12個(gè)月，生產(chǎn)日期見(jiàn)包裝。

4.本品為一次性產(chǎn)品，請(qǐng)勿重復(fù)使用。

5.如遇稀釋液不足，請(qǐng)用蒸餾水加入稀釋液中混勻后使用。

6.本品為篩選試劑，任何陽(yáng)性結(jié)果請(qǐng)用其他方法做進(jìn)一步確認(rèn)。

7.有條件的實(shí)驗(yàn)室可以用AFB1標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試后作為判斷參考。